表达HBV病毒的人肝细胞；HepG2.2.15

培养条件：

完全培养基：DMEM +10%FBS胎牛血清(进口)                              注：传代后，用G418选择一次，初次200ug/ml,最后480ug/ml
  培养条件：37℃  carbon dioxide(CO₂),5%

传代方法：

收到细胞后，取出培养瓶在显微镜下观察细胞生长情况。                    （一）如果细胞未超过80%汇合度时，用75%酒精喷洒整个瓶身消毒后放到超净台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
  (二)如果细胞已超过80%汇合度时，可根据情况进行传代培养。具体步骤如下：
  1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）润洗1-2次。
  2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置37℃培养箱中1-3分钟预热，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
  3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清，补加1-2ml培养液后吹匀。                                                       4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5ml培养基的新皿中或者培养瓶中。                                                                    5.    2-3天换液一次。
  注意：收到细胞后将细胞放入37度培养箱中预温1-2小时后再做处理，以稳定细胞状态。传代后细胞应该用新鲜的培养液，原瓶的培养液不能再使用。在运输过程中可能会导致一些贴壁不牢的细胞发生部分脱落，可离心吹打后重新种入瓶中培养。（收到细胞后3天内发现细胞异常请及时拍照并联系）

冻存方法：

冻存液：90%完全培养液，10%DMSO(现用现配)

储存：液氮储存