ATCC培养基收到后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。其使用相对来说不难,按规范使用即可:
1、首先取瓶内干粉,溶于1000ml蒸馏水或纯水中,可根据需求按74.7g/L的比例扩大、缩小。
2、将上述干粉缓慢倒入蒸馏水中,充分搅拌溶解。
3、加热至100℃并按常规不断搅拌。混合物也可以在微波炉中加热,用此法加热,煮沸后混合物立即移出微波炉并轻轻搅拌,而后移入微波炉再加热,直至琼脂完全溶解(大量气泡代替泡沫产生,大约需要2分钟)。
4、将培养基水浴冷却至48℃,倾注于已灭菌的培养皿中,使其凝固,
5、成品培养基在室温条件下可保存一天,在冰箱内可保存数周(避光,2-8℃)。
【注意事项】
1、称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。
2、干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。
3、自制平板时需注意培养基的厚度,厚度过薄容易造成琼脂水分保持性下降,开裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)体积培养基,平板培养基厚度至少为2mm。
4、即用型成品平板应该尽量保持在2-8℃下保存且与存放容器冷凝管保持一定距离以避免冻损坏。产品多次在低温与常温之间变更会引起琼脂的泌水,属于正常现象。使用前应平衡至室温且尽量在无菌干燥箱中预干燥。